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Virología. Volumen 4. Fundamentos

algunos éxitos notables, sobre todo en la producción de VLP. Una porción de la proteína estructural del marco de lectura abierto 2 del virus de la hepatitis E producida en Escherichia coli se autoensambla en partículas y mostró su eficacia en un estudio con 100000 personas. 511 Producción de proteínas víricas en células vegetales Se han modificado genéticamente plantas para expresar proteínas víricas 68,444 y VLP, 110 algunas de las cuales han avanzado hasta ensayos clínicos. Las plantas pueden ser diseñadas con determinadas gluco sidasas de mamíferos para ofrecer modificaciones postraduccionales más auténticas. 440 La principal ventaja de este abordaje es el potencial de una capacidad de fabricación barata y ampliamente distribuida. Purificación de proteínas La cromatografía de inmunoafinidad, la cromatografía de lectinas y las técnicas de separación física se han utilizado para purificar diver sas glucoproteínas víricas que han inducido una protección parcial o completa en animales. Cuando se compara directamente en anima les, la protección inducida por la inmunización es mayor cuando la glucoproteína vírica purificada está en su conformación natural. 463 En el caso del RSV y el EBV, las vacunas de glucoproteínas purifica das indujeron Ab capaces de unirse a la glucoproteína en enzimoin munoanálisis de adsorción, pero estos Ab tenían un grado muy bajo de actividad neutralizante. 323,487 En contraste con los inmunógenos proteínicos purificados, las glucoproteínas del RSV expresadas por un recombinante de la F o la G del RSV para vacuna indujeron un valor de Ab neutralizantes comparable al desarrollado por los anima les infectados por el virus. 96 Hallazgos de este tipo subrayan la impor tancia potencial de las estructuras cuaternarias y la presentación de las proteínas en el contexto de las membranas y organizadas en partículas para lograr respuestas de Ab funcionales. Péptidos sintéticos como inmunógenos A principios de la década de 1970, se estudió el uso de péptidos sintéticos como inmunógenos utilizando un icopéptido sintético que representaba el dominio inmunodominante de la proteína de la cubierta externa del bacteriófago MS-2. 257 Un péptido de 56 ami noácidos de la región del tallo de la HA del virus de la influenza puede inducir Ab contra un epítopo conservado que tiene cierta actividad neutralizante cruzada. 477 No obstante, la inmunidad indu cida por los péptidos suele ser menor que la conseguida cuando se utiliza como inmunógeno la proteína completa, el virus completo inactivado o el virus vivo atenuado. El hecho de que los epítopos de los linfocitos T CD8 + sean péptidos cortos de 8 a 10 aminoácidos de longitud presentados en el contexto del heterodímero del MHC de clase I sugirió que podría ser posible producir vacunas peptídicas para inducir la inmunidad mediada por CTL. 132 La inducción de CTL mediante vacunas pep tídicas se ha logrado en varios sistemas experimentales. Por ejemplo, un péptido, en adyuvante, indujo CTL y protegió a ratones contra la infección por el virus Sendai. 232 Una vacuna experimental basada en epítopos llamada Multimeric-001 (M-001) es una proteína recom binante única que consiste en tres repeticiones de nueve epítopos li neales conservados de la HA (cuatro epítopos de linfocitos B y uno de linfocitos T CD4 + ), la NP (dos epítopos de linfocitos T CD8 + y uno de linfocitos T CD4 + ) y la M1 (un péptido que contiene epíto pos de linfocitos B y linfocitos T CD8 + ), que se derivaron de cepas de los virus de la influenza A y B expresadas en E. coli . 34 Los estudios preclínicos en animales mostraron protección, pero en un ensayo clí nico de fase 3 finalizado en octubre del 2020 no se alcanzaron los cri terios principales y secundarios de eficacia del ensayo. Hasta ahora, las vacunas peptídicas no han logrado una inmunogenicidad signifi cativa cuando se utilizan en seres humanos inmunológicamente sin un péptido, en adyuv en epítopos llamada Multimeric-001 (M-001) es una proteína recom binante única que consiste en tres repeticiones de nueve epítopos li neales conserv © 2024 La inducción de CTL mediante vacunas pep Wolters oteína completa, el vir Kluwer, b contra un epítopo conser b contra un epítopo conservado que tiene cierta vado que tiene cierta No obstante, la inmunidad indu Inc. Un péptido de 56 ami

exposición previa ni inmunidad, a menos que se formulen en prepa rados con adyuzvantes potentes que se asocian con una reactogenia inaceptable. Además, en general, el abordaje reduccionista de los Ag de las vacunas no ha tenido éxito cuando se ha probado en humanos. Por lo general, es mejor emplear un mayor contenido antigénico en las vacunas contra virus, para que cada hospedero individual pueda selec cionar los epítopos más relevantes y eficaces para sí mismo. Este prin cipio también es coherente con el concepto de que la vacunación tiene su mayor repercusión en la salud pública a nivel poblacional. El desa rrollo de abordajes de vacunación personalizados y adaptados puede ser en un futuro lejano para las vacunas antivíricas preventivas, y este tipo de abordaje se está explorando actualmente para las vacunas tera péuticas contra las neoplasias y algunas infecciones víricas crónicas. De hecho, la inmunización con mezclas de péptidos largos derivados de las oncoproteínas E6 y E7 del HPV formuladas con adyuvante de Freund incompleto (IFA, incomplete Freund adjuvant ) ha conducido a la remi sión de la neoplasia intraepitelial vulvar inducida por el HPV-16. 233 Inmunización mediante inserción de genes La era de la biología molecular ha hecho posible construir vectores de expresión que pueden servir de vehículo para la inserción de genes de Ag vacunales. El desarrollo de esta tecnología es atractivo porque combina las ventajas de la inmunogenicidad de las vacunas con virus vivos atenuados y la seguridad de las vacunas con virus inactivados. Los genes pueden modificarse para que sean afuncionales e inofensi vos para el hospedero, mejorar la expresión y conservar la antigeni cidad de la proteína expresada. El uso de la célula hospedera para la producción transitoria de proteínas ofrece la oportunidad de expre sar estructuras más naturales que las que son posibles con la produc ción de proteínas in vitro , incluidos los patrones de glucosilación que pueden influir en la antigenicidad. Los genes pueden producirse sintéticamente de modo que no se necesite ningún componente del virus patógeno original en el proceso de fabricación para evitar las complicaciones potenciales de una infección con virus vivos o agen tes contaminantes. Determinados componentes inmunógenos de los patógenos pueden expresarse y combinarse con adyuvantes molecu lares que potencian y guían la composición de las respuestas inmu nitarias. Además, se pueden eliminar los mecanismos que emplean los virus para evadir o alterar las respuestas inmunitarias o se pueden modificar los genes (p. ej., añadiendo sitios de ubicuitinación) para mejorar el procesamiento y la presentación de los Ag. 433 Por lo tanto, puede ser posible mejorar la inmunidad proporcionada por la infec ción natural utilizando la expresión de Ag víricos basada en vectores. Los nuevos métodos de inserción, incluida la tecnología de vectores, brindan la oportunidad de combinar Ag de diversas cepas o diferen tes patógenos para permitir de manera potencial ampliar la inmu nidad inducida por la vacuna, simplificando al mismo tiempo los regímenes de vacunación. Estos métodos pueden clasificarse por sus propiedades funcionales ( véase e-fig. 15-7) y otras características que influyen en las estrategias de vacunación contra un virus concreto ( véase e-tabla 15-2). Vacunas de ácidos nucleicos El concepto de utilizar mRNA o ADN para administrar Ag vacu nales tiene muchas características atractivas, como la facilidad y la flexibilidad de construcción, la capacidad de fabricación escalable, la estabilidad, la producción de Ag vacunales en células hospede ras, la expresión transitoria, la ausencia de inducción de inmunidad antivectorial y la inducción de una respuesta equilibrada de linfo citos T CD4 + y CD8 + además de una respuesta de Ab. La inmu nización basada en genes promueve la síntesis y la expresión en la célula hospedera del Ag vacunal, así como el procesamiento pos traduccional fisiológico y el plegamiento en el citoplasma celular. sar estructuras más naturales que las que son posibles con la produc que pueden influir en la antigenicidad. Los genes pueden pr reproduction Los genes pueden modificarse para que sean afuncionales e inofensi vos para el hospedero, mejorar la expresión y conservar la antigeni oducción transitoria de pr of the content epercusión en la salud pública a nivel poblacional. El desa epercusión en la salud pública a nivel poblacional. El desa- - acunas antivíricas preventivas, y este tipo de abordaje se está explorando actualmente para las vacunas tera

) ha conducido a la remi is clas de péptidos largos derivados de las prohibited.

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