Boardman. Neonatología_8ed

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PARTE 2 • El feto como paciente

hibridación del ADN. Uno de estos abordajes es la hibridación genó‑ mica comparativa (HGC), que incluye ADN del paciente, marcado con un colorante verde, y un ADN testigo marcado con un colorante rojo, mezclados en proporciones equivalentes e hibridizados para un arreglo de secuencias de ADN genómicas únicas con mancha individual en una superficie. Las manchas correspondientes a las secuencias que están presentes en cantidades equivalentes en el paciente y el testigo darán una señal amarilla. Si el paciente presenta una deleción en una región específica, todas las manchas correspondientes a las secuencias se hibri‑ dizarán de manera desproporcionadamente mayor en el ADN del testigo y, por lo tanto, presentarán un color rojo. Por el contrario, si el paciente presenta una duplicación en una región específica todas las manchas correspondientes a la secuencia se hibridizarán más que su ADN y, por lo tanto, tendrán un color verde. En la versión más temprana de la hibri‑ dación genómica comparativa (HGC), ambos ADN se hibridizaron en cromosomas metafásicos normales en una laminilla y se analizaron bajo un microscopio de fluorescencia. Hoy se usa un arreglo de mayor resolu‑ ción de HGC (también denominado de “fragmentos de ADN”), donde los ADN se hibridizan con una micromatriz que contiene sondas correspon‑ dientes a regiones específicas del genoma. Se encuentra en uso clínico una variedad de diferentes sondas que incluyen a las grandes, deriva‑ das de cromosomas artificiales bacterianos (CAB), pequeñas, de secuen‑ cias de oligonucleótidos (oligoarreglos), e incluso todavía más pequeñas, de arreglos de polimorfismos de nucleótidos (PN). Las primeras HGC de arreglos contenían cientos a miles de sondas de CAB con casi 1 Mb de separación, lo que permitía la detección de VNC con dimensiones mayores de 1 Mb. La tecnología más reciente se basó en cientos de miles de pequeñas sondas de oligonucleótidos más pequeños y densos, que aportaron una resolución de hasta 50 a 100 kb, que permitía la detección de duplicaciones y deleciones que afectan a un solo gen. La principal ventaja de los arreglos de PN sobre otras plataformas, y de especial relevancia para el diagnóstico prenatal, son

(DGP) (120). La limitación fundamental del uso de HFIS en el contexto clínico es que en la mayor parte de los casos el clínico debe tener co‑ nocimiento previo o un alto índice de sospecha de la aberración cromo‑ sómica específica en cuestión. Microarray cromosómicos La limitación fundamental de HFIS, que obliga a la sospecha clínica y la selección de una sonda dirigida para una localización cromosómica espe‑ cífica, hace claro que se necesita un abordaje de citogenética molecular de todo el genoma para detectar desequilibrios en el número de copias con una mayor resolución. En los años previos los avances en las técnicas de citogenética molecular permitieron la detección de pequeños trastor‑ nos genómicos (p. ej., deleciones y duplicaciones), en general denomina‑ dos “trastornos submicroscópicos” (es decir, por debajo de la resolución de 5 a 10 Mb de la cariotipificación convencional), a una escala de todo el genoma. Algunas de estas microdeleciones o microduplicaciones se rela‑ cionan con síndromes clínicos bien conocidos y otros pueden tener impli‑ caciones clínicas significativas. Estos trastornos son resultado de cambios en la cantidad de material genético del cromosoma y, por lo tanto, se denominan variantes del número de copias (VNC), que incluyen dele‑ ciones y duplicaciones en el rango de miles a millones de pares de bases. Las VNC pueden ser benignas o patológicas, según su localización y contenido genético. Está bien documentado que estos trastornos son causas importantes no explicadas de retraso en el desarrollo/discapaci‑ dad intelectual (RD/DI), trastornos del espectro autista (TEA) y anoma‑ lías congénitas múltiples (ACM) ( fig. 10-7 ). En pacientes con estos trastornos las VNC contribuyen con 10 a 20% de los casos a pesar de resultados normales de los estudios citogenéticos convencionales (114). El análisis de MAC permite el estudio simultáneo de todo el genoma para identificar deleciones y duplicaciones de 100 a 1000 veces más pequeñas que las detectadas por el cariotipo, sin necesidad de prese‑ leccionar la diana. En general, la técnica se basa en las propiedades de

FIGURA 10-7 Microarray en la tetralogía de Fallot. Análisis de CMA en un feto con tetralogía de Fallot. En este panel, solo está representado el cromosoma 22. Los gráficos muestran un segmento del cromosoma 22, que cae por debajo de la línea de base compatible con dos copias (área bajo la barra horizontal roja ). Esto representa una deleción 22q11.2 característica del síndrome velocardiofacial/síndrome de DiGeorge (VCF/DGS). SAMPLE