Whelan. Virología. Vol 1, 7ed

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Virología. Volumen 1. Virus emergentes

positiva al tratamiento 239,727,736 y la remisión espontánea de la infec- ción por VHC. 623,754 Estos polimorfismos tienen menos poder pre- dictivo y su asociación con la eliminación del VHC se explica por el fuerte desequilibrio de conexión (LD, linkage disequilibrium ) con rs368234815- Δ G/rs368234815-TT. 554 Como ejemplo, un poli- morfismo de nucleótido único (rs12979860-C o rs12979860-T) identificado por GWAS se encuentra en el intrón 1 de IFNL4 , y la variante desfavorable (rs12979860-C) casi siempre se hereda con rs368234815- Δ G. 612 Un polimorfismo adicional (rs4803217) se encuentra en una región no traducida 3 ′ de IFNL3 ( véase fig. 8-7). 476 El alelo desfavorable es reprimido por especies de microARN celular inducidas por el VHC que desestabilizan o degradan el ARN mensa- jero (ARNm) de IFNL3 . 476 La contribución de este mecanismo a la evolución de la infección por VHC aún no está clara, ya que el poli- morfismo está en un fuerte desequilibrio de conexión con rs12979860. No se entiende bien aún cómo la expresión de IFN- λ 4 en indi- viduos con el alelo rs368234815- Δ G desfavorable perjudica la remi- sión espontánea de la infección aguda y la terapia antiviral basada en IFN tipo I. En el hígado infectado con VHC se encuentra ARNm de IFN- λ 4, 24,155 aunque en bajas concentraciones, quizá debido al control postranscripcional o postraduccional de la expresión génica. 296 El IFN- λ 4 se une al mismo receptor celular heterodimérico (IL-10R β /IFNLR1) que otras proteínas IFN- λ 278 y produce una res- puesta ISG poderosa en hepatocitos humanos primarios. 193,396,477,552 Una característica destacada de la respuesta ISG es la fuerte induc- ción de factores reguladores negativos, incluida la proteasa especí- fica de ubiquitina 18 (USP18, ubiquitin-specific protease 18 ). El gen USP18 bloquea la señalización de IFN tipo I a través del receptor IFNAR1/IFNAR2, 193,552,724,725 pero no tiene impacto en la señaliza- ción del IFN tipo III a través del receptor IL-10R β /IFNLR1. 65 El silenciamiento de la expresión de USP18 en hepatocitos tratados con IFN- λ 4 restaura la señalización de IFN tipo I, 193,725 lo que sugiere un papel para los mecanismos reguladores negativos en la poca capaci- dad de respuesta a la terapia con pegIFN/riba. En congruencia con esta posibilidad, USP18 está selectivamente regulado en el hígado de pacientes con infección crónica con una respuesta ISG preactivada asociada con el haplotipo rs386234815- Δ G. 113,156,552 La actividad constitutiva de los ISG en el hígado de pacien- tes con infección persistente se normaliza con el inicio del tra- tamiento con AAD. 17,86,99,620 Estos hallazgos proporcionan evidencia adicional de que la fuerte actividad de ISG en el hígado con infec- ción crónica es impulsada directamente por la replicación del VHC. Como se informó, los haplotipos de IFNL desfavorables se asocian con una disminución temprana más lenta de la viremia durante el tratamiento con AAD 485 y un mayor riesgo de recaída. 553 Aún falta determinar si el haplotipo IFNL influye en el momento o la magnitud de la recuperación de los ISG, con efectos sobre la disminución y des- aparición del VHC durante el tratamiento con AAD. Curiosamente, dos estudios han demostrado que un haplotipo IFNL4 desfavorable puede ejercer presión contra el VHC, seleccionando sustituciones de aminoácidos en la proteína NS5A del VHC que podrían facilitar la replicación del virus en un entorno de fuerte actividad de ISG o afectar la susceptibilidad a los inhibidores AAD. 27,826 Evasión de las respuestas al IFN I/III Los ISG inducidos por la infección por VHC tienen el potencial de interferir con cada etapa del ciclo de replicación vírica, incluyendo el ingreso, la replicación y la liberación. 494,495,662,663,839 Los mecanismos de evasión que subvierten la respuesta antivírica innata se investiga- ron mediante la expresión ectópica de proteínas del VHC individuales en líneas celulares transformadas y con replicones y aislados de VHC adaptados para la replicación en líneas celulares de hepatocitos ( véase fig. 8-5). 169,422 Recientemente se infectaron ratones repoblados con hepatocitos humanos con aislados de VHC genéticamente modifi- cados para demostrar la importancia de las proteínas víricas como la

NS5A en la evasión de la respuesta del IFN. 289 Aunque estos métodos tienen limitaciones, sugieren la posibilidad de una defensa multicapa contra los mecanismos efectores antivíricos. El fracaso de los sensores celulares para detectar el ARN del VHC es una posible primera línea de defensa. En congruencia con esta posibilidad, los receptores citosó- licos son excluidos de la red membranosa de vesículas citoplasmáticas reorganizadas donde se generan intermedios replicativos del VHC. 546 El ARN del VHC también es secuestrado en VDM producidas por la autofagia 209 y en vesículas extracelulares que son exportadas desde las células a través de una vía que evade los endosomas y la detección por el TLR3 ( véase fig. 8-5). 263 El bloqueo de las vías de señalización corriente abajo de los TLR y los receptores tipo RIG-I (RLR, RIG-I- like receptors ) de las proteínas del VHC proporciona una capa defensiva adicional. 169,422 La proteasa NS3/4A está dirigida a las proteínas adap- tadoras de señalización antivírica mitocondrial (MAVS, mitochondrial antiviral-signaling ) 426,500 y el dominio TIR con adaptador inductor de interferón β (TRIF, TIR domain-containing adapter-inducing interfe- ron- β ) 419 para la escisión en las células infectadas, bloqueando efectiva- mente las respuestas ISG. El TRIF también puede ser degradado por el VHC NS4B a través de un mecanismo dependiente de la caspasa 8. 428 Se ha descrito que el VHC reduce la estabilidad de las transcripcio- nes que codifican IFN- λ 2 e IFN- λ 3, 476 o el receptor de IFN tipo I 320 mediante microARN inducidos en los hepatocitos. La señalización de los receptores de IFN tipos I y III a través de la vía JAK-STAT también puede estar bloqueada por las proteínas E2 y NS5A del VHC cuando se expresan en líneas celulares. 169,422 La infección por VHC también puede alterar la activación de PKR ISG. Por un lado, la proteína NS5A expresada en células cultivadas y en ratones transgénicos unidas a la proteína cinasa regulada por ARN (PKR, protein kinase RNA-activated ) impidió la activación de su actividad antivírica ISG ( véase fig. 8-5). 229,381 Sin embargo, también se informó que el VHC activa la PKR para blo- quear la traducción dependiente del capuchón de proteínas efectoras ISG del hospedero, 31,234 un mecanismo de evasión que no perjudicaría la traducción mediada por IRES del genoma del VHC ( véase fig. 8-5). Quizá el bloqueo de la activación de la PKR en etapas tempranas de la infección durante la traducción inicial del genoma de ARN sea favo- rable para la replicación. Una transición a la activación de la PKR en una etapa posterior en el ciclo de replicación perjudicaría la traduc- ción de proteínas efectoras de ISG antivíricas y quizá proporcione una explicación para la coexpresión paradójica de genomas de ARN del VHC y ARNm de ISG en hepatocitos infectados. 808 Finalmente, la escisión de MAVS mediada por NS4A se ha observado in situ en hepa- tocitos infectados, lo que sugiere que este mecanismo de evasión está activo en el hígado. 419,500 Queda por determinar si otros mecanismos de evasión definidos en los modelos de cultivo celular contribuyen a la evasión de las respuestas inmunitarias innatas o a la persistencia del VHC. La replicación sostenida del VHC a través de las fases aguda y crónica de la infección, especialmente en sujetos con alta actividad constitutiva de ISG asociada con rs368234815- Δ G y polimorfismos relacionados, no puede explicarse por completo con estos modelos. Los mecanismos moleculares que contribuyen a la evasión de la respuesta pueden requerir una mayor comprensión de la actividad de ISG en la red membranosa donde se producen la replicación y el ensamblaje del genoma del VHC ( véase cap. 7). Las diferencias en la cinética de ISG, la susceptibilidad a la regulación negativa y el entorno antivírico hepá- tico inducido por una o más de las proteínas IFN- λ también pueden ser factores importantes para comprender por qué las respuestas inna- tas de IFN son ineficaces para controlar el VHC. 65,68,327,552,680 Respuestas de las células NK y evasión del VHC Durante la hepatitis C aguda se detectan en sangre linfocitos NK con actividad citotóxica potenciada y la producción de citocinas anti- víricas. 23,370,575 La activación de las células NK es estimulada por la unión directa de citocinas como IFN tipo I e IL-12, que se producen como parte de la intensa respuesta ISG en la fase aguda causada por