Howley. Virología ADN_7ed

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CAPÍTULO 2 • Papillomaviridae : los virus y su replicación

TABLA 2-3 Dianas celulares de las oncoproteínas E7 del papilomavirus humano

Proteínas celulares asociadas

Consecuencias funcionales

Referencias

pRB, p107, p130

Alteración de los complejos del factor de transcripción E2F Degradación

(75,76) (27,129)

Inhibición de la modulación anoikis

UBR4 y KCMF1

(59,115,286)

Inhibidores de la cinasa dependiente de la ciclina (p21 y p27)

Inactivación de la actividad inhibidora de las cdk

(89,128,296)

Zer1 (específico del HPV16)

Ubicuitinización de la pRB

(286)

PTPN14

Inhibición de la diferenciación de los queratinocitos

(255,285)

AP-1

Activación de la función de activación transcripcional de c-jun

(7)

Componentes del centrosoma (gamma tubulina)

Aneuploidía

(185)

IGFBP-3

Inhibición de la apoptosis mediada por IGFBP-3

(162)

E2F6

Prevención de la inhibición por parte de los complejos del grupo polycomb de E2F6

(170,171)

HDAC

Activación de la transcripción

(29,157,159)

IRF1 y p48

Bloqueo de la respuesta del interferón

(12,193)

Factor de transcripción cabeza de horquilla MPP2

Activación de la actividad transcripcional MPP2

(161)

RNF168

Alteración de la respuesta al daño del ADN del hospedero

(237)

Cullen 3

Todavía no se sabe

(286)

un mecanismo similar al de los poliomavirus y los adenovirus para activar los genes celulares necesarios para la replicación de su pro- pio ADN en células que, de otro modo, estarían en reposo. Estos virus pueden hacerlo a través de las proteínas E7 y su capacidad para liberar los factores de transcripción E2F mediante la unión de las proteínas de bolsillo, incluida la pRB ( véase la fig. 2-13). Además, la E7 se une y limita al inhibidor de las cdk p21 cip1 que normalmente se induce durante la diferenciación de los queratinocitos, presumi- blemente con el fin de permitir la replicación del ADN vírico en una célula diferenciada. Las proteínas E7 del HPV de alto riesgo, cuando se expresan en ausencia de E6, provocan un aumento de las con- centraciones de p53, lo que da lugar a una detención del ciclo celular mediada por G1 o a la apoptosis, dependiendo del tipo de célula. La E7 crea una señal que aumenta las cantidades de p53. La E6, al promover la degradación de p53, contrarresta esta actividad de E7 y permite la activación dependiente de E7 de los genes de replicación del ADN celular necesarios para la replicación del ADN vírico. E5 del HPV Muchos de los papilomavirus que inducen papilomas puramente epiteliales (como el CRPV y los HPV) contienen genes E5 con el potencial de codificar péptidos hidrófobos cortos. La similitud de estos péptidos con la proteína E5 del BPV1 ha hecho que se estudien las posibles actividades transformadoras de los genes E5 del HPV. Las proteínas E5 de los HPV son necesarias para un crecimiento óptimo. 83,92 En el cultivo de tejidos se ha demostrado que varios genes E5 del HPV tienen algunas actividades transformadoras modestas y, en ratones transgénicos, el E5 del HPV16 expresado en queratino- citos basales puede alterar el crecimiento y la diferenciación de los epitelios estratificados e inducir tumores epiteliales con una frecuen- cia elevada. 93 Además, recientemente se ha implicado a las E5 en la regulación por aumento del Met en los queratinocitos humanos. 231 Aunque los mecanismos bioquímicos por los que los genes E5 de los papilomavirus epiteliotrópicos ejercen sus efectos estimula- dores del crecimiento aún no se han dilucidado completamente, pueden implicar interacciones con el receptor EGF o la subunidad 16 kDa de la ATPasa vacuolar, cada uno de los cuales ha demos- trado unirse a las proteínas E5 del HPV. 49,93,119,250,298 También se ha demostrado que la E5 del HPV se une a la proteína A4 del retículo endoplasmático para regular la actividad proliferativa celular. 142 No obstante, cabe señalar que el gen E5 no se expresa en la mayoría de los cánceres positivos al HPV, lo que sugiere que si la pro- teína E5 estimula la proliferación celular in vivo , presumiblemente funciona en los papilomas benignos y no en los cánceres. También podría participar en el inicio del proceso carcinógeno o en algunos otros aspectos de la interacción virus-célula hospedera relevantes para la patogénesis de la infección por HPV. De hecho, también hay un informe que implicaría a E5 en la regulación por disminución de la expresión del antígeno clase II del complejo principal de histo- compatibilidad (MHC, major histocompatibility complex ). 297 Propagación y ensayos en cultivos celulares Los PV han demostrado ser difíciles de propagar in vitro porque el ciclo de vida completo requiere un epitelio escamoso estratificado, que no se imita en los cultivos en monocapa. Por lo tanto, la mayoría de las identificaciones clínicas de la infección por PV se basan en técnicas que identifican el ADN vírico, como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, polymerase chain reaction ) o la hibridación molecular, en lugar del aislamiento y el ensayo de las partículas víri- cas en cultivo celular. Las etapas tempranas e intermedias del ciclo de vida de muchos PV pueden estudiarse en células transfectadas con genomas víricos derivados de ADN recombinado. El BPV1 puede replicarse en fibro- blastos murinos y transformarlos, esta promiscuidad de especies es muy inusual pero el BPV1 es un fibropapilomavirus (un virus que se replica de forma no productiva en los fibroblastos dérmicos, así como de forma productiva en los queratinocitos suprayacentes). Los querati- nocitos humanos soportan la replicación de los genomas transfectados del HPV alfapapilomavirus; los HPV de los géneros Beta y Mu son más resistentes a la replicación debido a la fuerte función represiva de su proteína vírica E8^E2. 69 Los queratinocitos que contienen el genoma del HPV pueden ser inducidos a diferenciarse mediante el SAMPLE