Howley. Virología ADN_7ed

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CAPÍTULO 2 • Papillomaviridae : los virus y su replicación

nucleosómico. 264 Se han identificado otras dianas celulares de E6 (tabla 2-2); sin embargo, la relevancia fisiológica para el ciclo de vida del virus o para las funciones de transformación o inmortalización aún no se ha dilucidado para algunas de estas interacciones. En la literatura especializada se han descrito otras actividades independien- tes de p53 para las proteínas E6 del HPV del género alfa, incluida la activación de la traducción dependiente de la estructura cap. 245 Algunas revisiones recientes de la E6 del HPV proporcionan más detalles sobre estas interacciones. 104,111,281 La mayoría de los estudios realizados hasta ahora sobre la biología molecular de las proteínas E6 del HPV se han centrado en los tipos de HPV de alto riesgo del género alfa. Los estudios sobre los HPV cutáneos son más limitados y se sabe menos sobre las actividades celulares de los HPV cutáneos del género beta. Recientemente, se ha demostrado que los tipos E6 del HPV beta, así como el E6 del VBP1, se unen a MAML1 y a otros miembros del complejo de transcripción Notch. 32,217,256 MAML1 y E6AP se unen al complejo E6 a través de motivos LXXLL, la unión de MAML1 y E6AP a las distintas proteínas E6 del PV es mutuamente exclu- yente. 31,256 MAML1 es un componente central del complejo de activación transcripcional que media los efectos de la vía de señali- zación clásica Notch. El BPV1 y la E6 del HPV Betapapillomavirus reprimen la activación transcripcional de Notch y esta inhibición depende de una interacción con MAML1. Además, los grados de expresión de los genes diana Notch endógenos son inhibidos por las proteínas E6 del HPV Betapapillomavirus . 175,256 Los programas transcripcionales dependientes de Notch son esenciales en la diferenciación y detención del ciclo celular de los queratinocitos. 160,209 Además, recientemente se han notificado muta- ciones inactivadoras de la vía Notch en carcinomas de células esca- mosas de la cabeza, el cuello 3,251 y la piel, 282 en consonancia con la idea de que la señalización Notch es una vía supresora de tumores en las células epiteliales escamosas. 67 La unión de E6 a MAML1 proporciona un nuevo mecanismo de antagonismo vírico de la señalización de Notch y sugiere que la señalización de Notch es un objetivo importante de la vía de las células epiteliales para los HPV Betapapillomavirus . Curiosamente, aunque la mayoría de los estudios se han cen- trado en el HPV de alto riesgo del género alfa, se ha descubierto que

la proteína factor regulador de intercambio 1 de Na + /H + (NHERF1, Na + /H + exchange regulatory factor 1 ) celular se une a las proteínas E6 de alto y bajo riesgo, así como a las de diversas especies de mamíferos no primates. La unión da lugar a la degradación de NHERF1, lo que ocasiona la activación de la señalización clásica Wnt/catenina β , una vía clave que regula el crecimiento y la proliferación celulares. 70 E7 del HPV La proteína E7 codificada por los HPV de alto riesgo es una proteína nuclear pequeña, de unos 100 aminoácidos, y se ha demostrado que se une al cinc y es fosforilada por la caseína-cinasa II (CK II, casein kinase II ). La E7 es una proteína multifuncional que comparte algu- nas similitudes funcionales con el adenovirus (Ad) 12S E1A. 202 Las proteínas del HPV también comparten una importante similitud de secuencia de aminoácidos con partes de las proteínas AdE1A y el antígeno tumoral (TAg, tumor antigen ) grande del SV40 (fig. 2-13). Estas regiones conservadas son esenciales para algunas de las activida- des transformadoras en las tres oncoproteínas víricas, participan en la unión al producto del gen supresor de tumores del retinoblastoma pRB y a las proteínas de bolsillo relacionadas: p107 y p130. 56,76,287 La proteína del retinoblastoma es miembro de una familia de proteínas celulares que también incluye la p107 y la p130, que son homólogas en sus «bolsillos» de unión para E7, AdE1A y TAg del SV40. El estado de fosforilación de la pRB se regula a lo largo del ciclo celular, estando hipofosforilada en G 0 y G 1 y fosforilada durante S, G 2 y M. La pRB es fosforilada en múltiples residuos de serina por las cinasas dependientes de ciclina en el límite G1/S y permanece fosfo- rilada hasta finales de M, cuando vuelve a ser hipofosforilada por la acción de una fosfatasa específica (fig. 2-14). La forma hipofosfori- lada representa la forma activa con respecto a su capacidad de inhibir la progresión del ciclo celular. La E7 del HPV16, al igual que el TAg del SV40, se une preferentemente a la forma hipofosforilada de pRB, lo que provoca su inactivación funcional mediante la liberación de los factores de transcripción E2F, permitiendo así la progresión del ciclo celular en fase S. Esta propiedad de las oncoproteínas víricas de formar complejos con pRB explica, al menos en parte, su capacidad de inducir la síntesis de ADN y la proliferación celular. Las proteínas E7 del HPV de alto riesgo se asocian con las proteínas de bolsillo e inducen su degradación proteasómica. 27,129

HFEPPTLHE-LYDL HGDTPTLHEYMLDL FIGURA 2-13 Similitud de secuencia de aminoácidos entre porciones de las regiones conservadas 1 y 2 (CR1, CR2) de las proteínas E1A de Ad5 y los 38 aminoácidos aminoterminales de la E7 del HPV16. La CR2 contiene el sitio de unión del pRB y el sitio de fosforilación de la caseína-cinasa II (CKII) de la E7 del HPV16. SAMPLE E1A de Ad5 Unión a p600 Unión a pRB Transformación, degradación de pRB Unión a metal, dimerización VPEVIDLTCHEAGFPPSDDEDE QPETTDLYCYEQLNDSSEEEDE E7 de HPV-16 E7 de HPV-16 CR1 CR2 37 49 116 137 2 15 16 L-X-C-X-E CK II C-X-X-C C-X-X-C 37