Howley. Virología ADN_7ed

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CAPÍTULO 2 • Papillomaviridae : los virus y su replicación

y las células de roedores, ambos infectados por BPV1, el tejido verrugoso infectado por MmuPV1 y las lesiones inducidas por el SfPV1 en conejos cola de algodón. También se han mapeado los transcritos víricos en los HPV Mupapillomavirus (HPV1) y en los HPV Betapapillomavirus (HPV5 y 8). Sin embargo, los más estu- diados son los de los HPV Alphapapillomavirus asociados con las lesiones del conducto genital, como HPV11, HPV16, HPV18 y HPV31. Se han identificado transcritos que representan todas las etapas del ciclo infeccioso en líneas celulares de carcinoma cervi- couterino, sistemas de cultivo organotípico diferenciados, tejido de xenoinjerto infectado en ratones desnudos (lampiños) y lesio- nes clínicas positivas al HPV. Los mapas de transcripción de todos los papilomavirus pueden encontrarse en (https://pave.niaid.nih. gov/#explore/transcript_maps) (fig. 2-8). ARN víricos y promotores La transcripción del papilomavirus es compleja debido a la presen- cia de múltiples promotores, patrones de empalme alternativos y múltiples, así como por la síntesis temporal de diferentes especies de ARNm en las células diferenciadas (revisado en la ref. 99). En los HPV Alphapapillomavirus oncógenos la transcripción se pro- duce en fases tempranas, intermedias y tardías, cada una de ellas dependiente del estadio de diferenciación del queratinocito hos- pedero. La transcripción temprana se produce en las capas infe- riores de un papiloma, la intermedia coincide con la replicación productiva del ADN y la tardía genera las proteínas de la cápside. En la figura 2-8 se muestra un mapa de transcripción de un HPV y

demuestran que la proteína L2 unida a la cápside experimenta más cambios conformacionales y se transloca a través de la membrana endosómica, dando lugar a viriones intactos encerrados en vesículas de membrana. 130 La porción de L2 expuesta al citoplasma interactúa con el retrómero para transportar las vesículas que contienen el virus a la red del trans Golgi (TGN, trans-Golgi network ). 61,205 La entrada de las vesículas que contienen el HPV en el núcleo requiere la rotura de la envoltura nuclear durante la mitosis, más que el transporte activo a través de los poros nucleares. 208 Durante la mito- sis, las vesículas de la membrana que contienen el virión se unen a los cromosomas mitóticos condensados de la célula hospedera, 61 presumi- blemente para retenerlos en el núcleo hasta después de que se reforme la membrana nuclear y evitar la detección del ADN vírico citoplas- mático por parte de los sensores inmunitarios innatos. Después de la división celular, condensados nucleares específicos llamados cuerpos nucleares de la proteína de la leucemia promielocítica (PML-NB, prom- yelocytic leukemia protein-nuclear bodies ) se reforman en asociación con las vesículas que contienen el HPV. 101 Los PML-NB son frecuente- mente secuestrados por los virus de ADN y su localización promueve la transcripción del genoma del HPV 55 a pesar de que estas estructuras contienen factores antivirales que reprimen la replicación y transcrip- ción de los virus de ADN entrantes. 228 No es de extrañar que los virus contrarresten estos factores represivos y que, en consecuencia, la L2 del HPV desplace a los represores Sp100 de las PML-NB. 87 Transcripción vírica La transcripción del PV en animales se ha estudiado mucho en una variedad de sistemas diferentes, como el tejido verrugoso bovino

E1

E5

E7

L2

1 2 3

MARCOS

L1

E2

E6

E4

P E

P L P E8

pA E

pAL

URR

E1 E2 E6 E7

E8^E2 E1^E4 E5 E1^E4 E2 E1 FIGURA 2-8 Mapa de transcripción de un HPV Alphapapillomavirus oncógeno . En la parte superior se muestra una versión lineal del genoma vírico. Hay tres fases de transcripción que dependen del estado de diferenciación de las células infectadas: los transcritos tempranos utilizan el promotor temprano (P E ) y el sitio de poliadenilación (pA E ), los intermedios el promotor tardío (P L ) y el sitio de poliadenilación temprano (pA E ), los tardíos el promotor tardío y los sitios de poliadenilación (P L y pA L ). SAMPLE TEMPRANA INTERMEDIA L2 L2 L1 L1 TARDÍA