Howley. Virología ADN_7ed

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Virología. Volumen 2. Virus de ADN

de las proteínas de las partículas del virus mostró que el ADN vírico se asocia con las histonas celulares para formar un complejo similar a la cromatina. 81,200 Las VLP pueden producirse a partir de diferentes PV expre- sando L1 solo mediante sistemas de expresión de mamíferos o no mamíferos, 103,136,214 y son la base de la vacuna contra el HPV, que ha tenido un gran éxito (capítulo 3). La morfología de las VLP que contienen solo L1 parece idéntica a la de las partículas víricas intac- tas en las reconstrucciones con cryo-EM de baja resolución, 102 pero las reconstrucciones casi atómicas revelan la presunta ubicación de la proteína L2. 100 La estructura de una VLP truncada de HPV16 T = 1, que contiene 12 pentámeros, se ha resuelto mediante cristalo- grafía de rayos X con una resolución de 3.5 Å. 44 La estructura de los viriones del BPV1 de tamaño completo se ha dilucidado mediante cryo-EM con una resolución de 3.6 Å. 289 Hasta la fecha se han secuenciado en su totalidad más de 650 genomas de papilomavirus humanos y animales, la organización genómica gene- ral de cada uno es muy similar (https://pave.niaid.nih.gov/). 272 Cada virus contiene una región reguladora, de cerca de un kilopar de bases de tamaño, que contiene el origen de replicación, los elementos poten- ciadores y represores de la transcripción, así como los promotores. Esta región se ha denominado alternativamente región reguladora en dirección 3 ′ a 5 ′ (URR, upstream regulatory region ), región de control larga (LCR, long control region ) o región no codificadora (NCR, non- coding region ). El resto del genoma se divide en las regiones de codifi- cación temprana y tardía. Todos los ORF víricos se encuentran en una cadena, que sirve de plantilla para la transcripción. En la figura 2-4 se muestra la organización del genoma del HPV Alphapapillomavirus . Todos los genomas del PV codifican cuatro proteínas princi- pales: las proteínas de replicación E1 y E2 (codificadas en la región temprana) y las proteínas de la cápside L1 y L2 (codificadas por la región tardía y expresadas solo en las células infectadas productiva- mente). Casi todos los PV también codifican dos proteínas de fusión que se expresan a partir de ácidos ribonucleicos mensajeros (ARNm) empalmados tempranos. La E8^E2 contiene unos pocos aminoáci- dos codificados por el ORF de E8 (se superpone a E1) fusionado ESTRUCTURA Y ORGANIZACIÓN GENÓMICAS

El análisis estructural, mediante microscopía electrónica crio- génica (cryo-EM, cryogenic electron microscopy ) y de reconstrucción de imágenes tridimensionales, reveló que los virus están formados por 72 capsómeros pentaméricos dispuestos en una red de superficie T = 7. 10,267 Los capsómeros están compuestos por cinco moléculas de L1 y una molécula de L2 que ocupa el lumen axial. 33 Al igual que en las cápsides de los poliomavirus, los capsómeros existen en dos entornos, uno capaz de hacer contacto con seis vecinos, como se observa en los 60 capsómeros hexavalentes, y el otro con 5 vecinos en los 12 capsómeros pentavalentes del vértice (fig. 2-3). El análisis FIGURA 2-2 Micrografía electrónica de las partículas del virión de BPV1 (55 nm de diámetro) (Baker TS, Newcomb WW, Olson NH, et al. Structures of bovine and human papillomaviruses—analysis by cryoelectron microscopy and three-dimensional image reconstruction. Biophys J 1991;60:1445-1456. Copyright © 1991 The Biophysical Society. Reproducida con autorización).

SAMPLE

FIGURA 2-3 A) Reconstrucción 3D de un virión del BPV visto en un eje de 5 pliegues. 267 B) Reconstrucción 3D de una vista interna (seccionada) de las partículas similivíricas (VLP) L1/L2, del HPV, con la densidad espe- cífica de la L2 en rojo (adaptada de Buck CB, Cheng N, Thompson CD, et al. Arrangement of L2 within the papillomavirus capsid. J Virol 2008;82(11):5190-5197. Copyright © 2008 American Society for Microbiology. Modificada con autorización de la American Society for Microbiology).