Kau. Manual Washington: Alegia, asma_3ed

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Capítulo 3 Diagnóstico en alergia e inmunología

■ El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima (ELISA, por sus siglas en inglés) utiliza anti- cuerpos anti-IgE ligados a enzimas. Cuando se agrega el sustrato de la enzima, la reacción genera un producto coloreado. Los inmunoensayos con enzima fluorescente (FEIA) y los inmunoensayos quimioluminiscentes son estudios adicionales similares a ELISA básica y se basan en reacciones que generan un producto fluorescente o quimioluminiscente. 14 El método de fase sólida es el más utilizado. En este, los alérgenos se fijan a un sustrato “inmunoabsorbente” o “alergoabsorbente” — una matriz específica, como una placa plástica, celulosa, disco, cuenta, entre otros. El suero del paciente se incuba con el inmu- noabsorbente y, si hay IgE específica para el antígeno en el suero, se unirá al complejo alérgeno–inmunoabsorbente. Cualquier componente del suero sin unir se enjuagará. Luego se agregan anticuerpos anti-IgE humana secundarios y se crea un complejo de alérgeno-IgE específica del paciente–anticuerpos anti-IgE humana. Este complejo se de- tecta y mide por ELISA o RAST, como ya se describió antes. Los inmunoensayos de fase líquida se realizan con soluciones de alérgenos y anticuer- pos. La técnica de unión competitiva puede utilizarse tanto con estudios líquidos como sólidos. Mide los niveles específicos de IgE mediante la cuantificación del efecto inhi- bidor de los anticuerpos IgE específicos del paciente medidos en la fijación de un anti- cuerpo control con una concentración conocida. El diagnóstico resuelto por componente (CRD, por sus siglas en inglés ) es un método de va- loración relativamente nuevo que permite la identificación más específica de los epítopes antigé- nicos precisos de un alérgeno al cual es alérgico un paciente dado. Ayuda a identificar pacientes con alergia a un componente de diferentes alérgenos que tienen reacción cruzada y comparten similitudes estructurales entre sí, como la familia PR10 de alérgenos (p. ej., Bet v 1—abedul, Mal d 1—manzana, Pru p 1—durazno, Gly m 4—soya, Ara h 8—maní, Api g 1—apio, Dau c 1—zanahoria ). 14 ■ El CRD se utiliza en clínica ante todo para el diagnóstico de alergia a alimentos, y en especial para alergia al maní. En la alergia al maní, los pacientes sensibilizados a componentes relacio- nados con polen, como el alérgeno de maní Ara h 8 (que se relaciona con algunos alérgenos de polen de abedul), por lo general no presentan síntomas orales o estos son leves, mientras aquellos sensibilizados a componentes más estables, como proteínas de almacenamiento de semillas (p. ej., Ara h 2), tienen mayor probabilidad de presentar reacciones sistémicas al maní. Los estudios de CRD para alimentos incluyen, además del maní, frutos secos de árbo- les, trigo, vegetales, frutas, leche y huevo de gallina. 7,15 ■ Puede ayudar a predecir reactividad cruzada entre alérgenos de alimentos y polen, así como el tipo de reacción que tendrá un paciente. Este es un avance importante debido a que los inmunoensayos estándar de IgE pueden detectar IgE contra epítopes que no tienen relevancia clínica y no se relacionan con síntomas, lo que produce resultados falsos positivos en pacien- tes que no tienen reacción clínica al alérgeno en cuestión. ■ Un ejemplo de CRD disponible en el mercado es ImmunoCAP™, que permite detectar IgE contra > 100 componentes individuales de alérgenos, derivados de > 50 fuentes de alérgenos. Distintas técnicas y pruebas de inmunoensayo para alérgenos específicos tienen una amplia gama de sensibilidad (60-95%) y especificidad (30-95%), un intervalo que es mayor que el esperado en la valoración para alergia cutánea. 1,16 Se ha informado una concordancia entre diferentes sistemas de inmunoensayo cercana a 75 - 90% para alérgenos bien caracterizados. 1,16,17 Las mejores pruebas disponibles son para pólenes de pastos y árboles, ácaros y alérgenos de gato, con sensibilidad, especificidad y valores predictivos > 90%. En niños, algunas de las pruebas para alérgenos alimentarios principales tienen un valor predictivo positivo muy alto (ImmunoCAP™). 1,18 En general, las pruebas menos precisas incluyen aquellas para venenos, alimentos, pólenes de hierba, látex, fármacos, perros y mohos. 1 Por lo general, los resultados se informan en kUa/L para IgE específica para el alérgeno (o kUI/L para mediciones de IgE total) , 14 mientras otros inmunoensayos se informan en nanogramos de IgE/mL. La conversión es 1 kUI/L = 2.4 ng IgE/mL . SAMPLE