Howley_Fundamentos.7ed

432

Virología. Volumen 4. Fundamentos

tras la inoculación. 453 Dado que la estimulación del sistema inmuni tario innato por los replicones del VEE también parece potenciar las respuestas inmunitarias adaptativas, los replicones que no expresan un Ag vacunal pueden usarse como adyuvantes para potenciar la respuesta protectora a las vacunas de subunidades. 66 Uno de los obs táculos para utilizar vectores de alfavirus es demostrar que los virus recombinantes competentes para la replicación no se reconstituyen por recombinación a las concentraciones de inoculación extremada mente altas solicitadas por los reguladores (que superan las concen traciones usadas en los protocolos de fabricación). Vectores de virus del herpes Los HSV con replicación defectuosa se han producido de forma análoga a los adenovirus con deficiencia de la E1A, es decir, se les han eliminado uno o más genes esenciales para la replicación, pero la replicación in vitro se mantiene en una línea celular que expresa de forma constitutiva la proteína esencial necesaria para la replica ción. 109,306 A diferencia de los adenovirus con deficiencia de la E1, los HSV con replicación defectuosa se están desarrollando como vacu nas contra la enfermedad causada por el propio HSV, así como vec tor para transportar proteínas víricas exógenas. Otro abordaje para la construcción de vectores consiste en empaquetar amplicones del HSV con replicación defectuosa en partículas de HSV utilizando virus auxiliares codificados con cromosomas artificiales bacterianos con secuencias de empaquetamiento eliminadas que dan lugar a la expresión de genes exógenos sin la influencia de ningún gen resi dual del HSV. 168 Vectores de poxvirus Se han desarrollado vectores de poxvirus atenuados con replicación defectuosa para hacer frente a las conocidas complicaciones del virus vaccinia en personas inmunodeprimidas. Los vectores más desarro llados son el virus MVA, el avipox (viruela del canario y viruela aviar) y el NYVAC (deleción deliberada de 18 genes asociados con la virulencia). 354 El virus MVA se obtuvo mediante más de 500 pases en células de embrión de pollo 284,296 y ha sido evaluado como vec tor vacunal para una variedad de Ag víricos. El virus MVA es un mutante del rango de hospederos altamente atenuado que se replica bien en células aviares, tiene una replicación limitada en linfocitos BSC-40 y en células de riñón de hámster bebé, pero no se propaga en la mayoría de las células de mamíferos. 41,65,125 El virus MVA no es patógeno en hospederos inmunodeprimidos y se ha administrado a un gran número de humanos sin accidentes. 285,439,483 La atenuación del virus recombinante MVA se debió a la pérdida de casi 30 kb del genoma, incluidos los genes para la evasión inmunitaria y el rango de hospederos durante sus muchos pases en huevos embrionados. 12 El uso de poxvirus aviares, denominados virus avipox , como vec tores representa un segundo tipo de vector de poxvirus de rango restringido. Los virus avipox son virus naturales de rango de hospe deros restringido con replicación deficiente en células de mamíferos y hospederos mamíferos. 354 Cada uno de estos vectores de poxvi rus tiene la propiedad de replicación eficiente in vitro en cultivo celular aviar pero replicación restringida en primates. Los vectores de avipox tienen una ventaja añadida, ya que la inmunidad pre existente a la vaccinia no afecta la administración del vector. Los vectores de poxvirus presentan las siguientes ventajas: 1 ) termoes tabilidad, 2 ) antecedentes de estar asociados con el extraordinario éxito de la campaña de erradicación de la viruela, 3 ) gran capaci dad de empaquetamiento de genes exógenos y 4 ) ausencia de persis tencia o integración genómica. Las principales desventajas son que 1 ) los vectores atenuados se cultivan en líneas celulares primarias (fibroblastos de embrión de gallina) y la producción es difícil de ampliar, 2 ) la inserción del gen exógeno es a veces inestable y 3 ) los poxvirus son antigénicamente complejos y puede haber competen y hospeder y hospederos mamífer os mamífer celular aviar per de avipox tienen una ventaja añadida, ya que la inmunidad pre ector © . Los virus avipox son virus naturales de rango de hospe 2024 Wolters Kluwer, rango de hospederos altamente atenuado que se replica Inc. y ha sido evaluado como vec vaccinia en personas inmunodeprimidas. Los vectores más desarro AC (deleción deliberada de 18 genes asociados con

cia entre el vector y los productos génicos insertados para el proce samiento y la presentación de Ag. Tras una amplia evaluación de fase I y fase II, 166,369 se evaluó una vacuna recombinante contra el virus de la viruela del canario en un controvertido estudio de eficacia de fase III, el RV144. 56 Este estudio histórico constituye un punto de referencia como primera demos tración de la eficacia de una vacuna contra el HIV. 388 En el estudio se incluyó una cohorte de población general de 16402 personas en Tai landia y se asignó aleatoriamente un receptor de vacuna frente a un receptor de placebo. Los vacunados recibieron inyecciones intramus culares de un vector recombinante del virus de la viruela del canario que expresaba la E, la Gag y partes de la Pol y la Nef administradas a los 0, 1, 3 y 6 meses y rgp120 formulado con alumbre administrado a los 3 y 6 meses. A los 18 meses, se habían producido 74 infecciones en los receptores de placebo y 51 infecciones en los vacunados, lo que fue estadísticamente significativo. Un rgp120 similar no protegió a los hombres que tienen relaciones sexuales con otros hombres 161 ni a los consumidores de drogas intravenosas ilegales, 368 poblaciones con una incidencia mucho mayor. El marcador inmunitario de la protec ción aún no se ha definido, pero la protección parece estar tempo ralmente asociada con los valores de Ab en suero, aunque los sueros de los vacunados no neutralizan las cepas comúnmente transmitidas mediante los análisis tradicionales. Limitaciones de los vectores génicos Está fuera del alcance de este capítulo cubrir la creciente lista de vectores potenciales para insertar genes que codifican Ag víricos que pueden ser considerados para el desarrollo de futuras vacunas. Por ejemplo, los vectores de arenavirus 142 y lentivirus 112 no se han tratado aquí y se han desarrollado sistemas de genética inversa para otras familias de virus 240 que harán factible el desarrollo de vectores recombinantes. Cada sistema tiene un conjunto singular de propie dades que deben tenerse en cuenta a la hora de diseñar una estrategia para un patógeno concreto. Una de las consideraciones primordia les es la seroprevalencia del vector en la población diana. La inmu nidad preexistente específica contra el vector puede afectar tanto la seguridad como la potencia de la vacuna. Esta interacción puede ser un problema si existe inmunidad natural contra el vector o si con vergen en las mismas plataformas de vectores programas de vacunas competidoras para otros patógenos importantes. Hay varios facto res relacionados con la seguridad, la selección de Ag, la inmuno genicidad, la fabricación y la estabilidad que es importante tener en cuenta en el momento de desarrollar una estrategia de vacuna basada en vectores que sean específicos para el patógeno y la pobla ción diana ( véase e-tabla 15-2). Vectores víricos como vacunas contra el virus del que deriva el vector Un subproducto práctico del desarrollo de vectores de vacunas anti víricas de replicación defectuosa basados en genes es que el propio vector puede servir como una nueva plataforma de vacunas para el virus del que se derivó el vector. Los ejemplos más avanzados son los vectores de poxvirus como el virus MVA o el NYVAC. Ambos han sido evaluados como vacunas antivariólicas experimentales en ensayos clínicos utilizando vaccinia compatible para la replicación (Dryvax ® ) como exposición sustituta. 152,357 Este tipo de abordaje tam bién se ha propuesto para virus del herpes 128 y adenovirus. El uso del vector vírico crea la oportunidad de expresar Ag víricos adicionales 4 o proteínas inmunomoduladoras como citocinas 75 que podrían propor cionar efectos adyuvantes y aumentar la inmunogenicidad en com paración con la plataforma de virus vivos atenuados. Otra ventaja de este abordaje es que el vector proporciona la complejidad antigé nica de una vacuna con virus vivos atenuados con un perfil de riesgo más favorable debido a la ausencia de replicación. Además, el vec recombinantes. Cada sistema tiene un conjunto singular de propie reproduction acunados no neutralizan las cepas comúnmente transmitidas of the una incidencia mucho mayor. El marcador inmunitario de la protec ción aún no se ha definido, pero la protección parece estar tempo content is prohibited. 402 personas en T 402 personas en Tai ai . Los vacunados recibieron inyecciones intramus ag y partes de la Pol y la Nef administradas a

Unauthorized

Copyright