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Virología. Volumen 4. Fundamentos

Bases genéticas de la atenuación de los virus vivos Los mutantes seleccionados mediante el pase en un hospedero no natural acumulan muchas mutaciones, lo que a menudo dificulta la definición precisa de la base genética de su atenuación. En al gunos casos, se ha definido la base molecular de la atenuación. Se ha definido parcialmente la base genética de la neuroatenuación de cada una de las tres cepas vacunales del virus de la poliomieli tis. 182 Sorprendentemente, son pocas las mutaciones implicadas. Los análisis han identificado sustituciones de nucleótidos atenuantes en las secuencias no codificantes 5 ′ y otras atenuantes en la región no codificante 3 ′ o en las regiones codificantes estructurales o no estructurales de los virus de la poliomielitis de tipos 1, 2 o 3. 47,160,389 Estas mutaciones pueden ahora controlarse durante la fabrica ción y tras la replicación in vivo . Se ha mostrado que los lotes de vacunas con una mayor frecuencia de reversión en algunos residuos presentan una mayor neurovirulencia, y dichos lotes pueden des cartarse como inaceptables para el uso humano. 81 Así pues, ahora es posible utilizar técnicas virológicas moleculares para controlar la fabricación de vacunas identificando la presencia de las mutacio nes atenuantes deseadas, así como la ausencia, o baja frecuencia, de reversiones no deseadas. 81 El abordaje jenneriano para el desarrollo de virus vivos atenua dos implica el uso de una cepa vírica de origen mamífero o aviar para inmunizar a los humanos contra un virus humano relacionado antigénicamente con la cepa animal o aviar. Los virus de mamíferos y aves que están bien adaptados a su hospedero natural a menudo no se replican eficazmente en los seres humanos y, por lo tanto, se atenúan. Esta restricción del rango de hospederos fue, por supuesto, el principio original utilizado por Jenner para la primera vacuna. En la actualidad, carecemos de una comprensión completa de la base genética de esta forma de restricción del rango de hospederos. No obstante, los genes de virus de mamíferos o aves que se han identifi cado como responsables de la restricción del rango de hospederos en humanos presentan una divergencia considerable de la secuencia de nucleótidos con respecto a la de los genes de virus humanos corres pondientes. La vacuna tetravalente y la pentavalente contra el rota virus son ejemplos del abordaje jenneriano de desarrollo de vacunas en las que se descubrió que una cepa de rotavirus no humana, el rotavirus rhesus (RRV, rhesus rotavirus ) o el rotavirus bovino (BRV, bovine rotavirus ), se atenuaba en los humanos. Dado que se necesi taba una vacuna polivalente que indujera resistencia a cada uno de los principales serotipos de los rotavirus humanos, se modificó el abordaje jenneriano construyendo tres virus reordenados, cada uno de los cuales contenía 10 genes de RRV o de BRV más un único gen de rotavirus humano que codificaba uno de los principales Ag de neutralización de los serotipos seleccionados. Las técnicas convencionales de atenuación de virus, como el pase del virus a baja temperatura, la mutagénesis seguida de la selección de mutantes con el fenotipo o fenotipos deseados, o el pase del virus en tejidos heterólogos siguen desempeñando un papel importante en el desarrollo de vacunas con virus vivos atenuados. Estas técnicas se han utilizado para generar cepas vacunales experimentales para el CMV, ortovirus y paramixovirus, alfavirus, flavivirus, el virus de la hepati tis A y arenavirus. Se cree que la selección para una combinación de fenotipos (como el adaptado al frío [ ca , cold-adapted ] y el sensible a la temperatura [ ts , temperature sensitive ]) es deseable porque las diferen tes mutaciones pueden tener efectos sinérgicos en la estabilidad del fenotipo de atenuación in vivo . 321 La función de las proteínas víricas puede verse alterada por mutaciones de aminoácido, inserciones o deleciones. Clásicamente, los virus atenuados se identificaban utilizando fenotipos biológicos: 1 ) mutantes ts , 2 ) mutantes pasados por frío ( cp , cold-passaged ) o mutantes ca , 3 ) mutantes de placa pequeña, 4 ) mutantes por activa ción de proteasa ( pa , protease activation ) (también designados como mutantes de escisión ) y 5 ) mutantes con alteraciones de la interacción reproduction eversiones no deseadas. El abordaje jenneriano para el desarrollo de virus vivos atenua para inmunizar a los humanos contra un vir of fabricación de vacunas identificando la presencia de las mutacio the content Estas mutaciones pueden ahora controlarse durante la fabrica or frecuencia de reversión en algunos residuos presentan una mayor neurovirulencia, y dichos lotes pueden des is prohibited. de cada una de las tres cepas vacunales del virus de la poliomieli -

Durante la fabricación de la vacuna, las mutaciones que se asocian con la restauración de la virulencia pueden detectarse con una fre cuencia baja variable mediante el análisis de secuencias, y la neuro virulencia del producto final puede mantenerse a un valor bajo rechazando los lotes de vacunas que superen la norma aceptada para la frecuencia de estas mutaciones. 81 La inestabilidad genética tam bién fue un problema con la vacuna contra el YFV 17D durante los primeros ensayos de campo. Se observó encefalitis en el 1% al 2% de los jóvenes vacunados a los que se les había administrado un virus pasado 20 veces a partir del lote de siembra original. 149 El problema de la inestabilidad genética de las vacunas con virus vivos atenuados tras su replicación in vivo es aún más preocupante en el caso de los virus que pueden causar una infección latente o persis tente in vivo , como los virus del herpes o los lentivirus, por ejemplo, el HIV. A pesar de esta preocupación, se han desarrollado con éxito vacunas contra el VZV, un virus del herpes que causa la varicela y el herpes zóster, lo que indica que se puede desarrollar con éxito una vacuna con virus vivos atenuados contra un virus que causa una infec ción de por vida en los seres humanos. Esta vacuna se autorizó por primera vez para la prevención de la varicela en niños y mostró reducir notablemente el riesgo de reactivación del VZV o de herpes zóster. 348 El virus de la rubéola puede recuperarse de los linfocitos de individuos inmunitariamente normales con artritis hasta 6 años des pués de la vacunación o la infección natural, 74 pero la vacuna contra la rubéola no parece estar asociada con la artritis crónica. 385 Curio samente, no se ha detectado la persistencia del virus de la vacuna contra el sarampión ni se ha implicado al virus vacunal en la panen cefalitis esclerosante subaguda. 297 En cambio, el uso generalizado de la vacuna con virus vivos atenuados contra el sarampión casi ha erra dicado esta poco frecuente pero grave secuela de la infección persis tente por el virus del sarampión de tipo silvestre. Se han identificado otras preocupaciones en relación con las vacunas con virus vivos atenuados. En primer lugar, existe un riesgo teórico de que se produzca una infección en el feto tras la vacu nación durante el primer trimestre del embarazo. En el caso de la vacuna contra la rubéola, existe la preocupación de que la vacunación pueda conducir al desarrollo del síndrome de rubéola congénita; sin embargo, el riesgo real parece ser insignificante. 355 En segundo lugar, los virus de tipo silvestre que se producen de forma natural pueden interferir en la infección por una vacuna con virus vivos ate nuados, lo que resulta en una disminución de la eficacia de la vacuna. Estas interferencias se han observado principalmente con cepas va cunales de virus de la poliomielitis vivos atenuados y son causadas por una amplia variedad de virus entéricos. Este fenómeno también se ha observado con vacunas experimentales con alfavirus vivos atenua dos. 288 Para superar esta interferencia virus-virus, se requieren varias dosis de vacunas polivalentes con virus vivos atenuados para asegurar una respuesta inmunitaria protectora contra cada componente. En tercer lugar, se han identificado partículas defectuosas interferentes en preparaciones de vacunas con virus vivos atenuados, 60 y es proba ble que estén presentes en algún grado en todas las vacunas con virus vivos atenuados. En cuarto lugar, la vacuna con virus vivos atenuados contra el sarampión se ha asociado con una inmunosupresión gene ralizada que se observó que estaba directamente correlacionada con el grado de respuesta inmunitaria a la vacuna. 215 Por último, cabe señalar que la estabilidad es un grave pro blema práctico con los virus vacunales termolábiles, como el virus del sarampión. La necesidad de almacenar y transportar la vacuna contra el sarampión a baja temperatura (4ºC) ha limitado su utilidad en algunas zonas tropicales donde es difícil mantener una «cadena de frío» para su transporte y almacenamiento. Se han identificado algunas soluciones sencillas para estabilizar otras vacunas con virus vivos atenuados, como la liofilización del virus vaccinia o el uso de óxido de deuterio para el agua en las formulaciones de vacunas con virus vivos atenuados contra el virus de la poliomielitis o el virus de la influenza, 216,300 pero es necesario seguir trabajando. os atenuados. E contra el sarampión se ha asociado con una inmunosupresión gene grado grado de de Por último, cabe señalar que la estabilidad es un grave pro © 2024 Wolters encias se han observado principalmente con cepas va cunales de virus de la poliomielitis viv os atenuados y son causadas por ha observado con vacunas experimentales con alfavirus vivos atenua Kluwer, pueden interferir en la infección por una vacuna con virus vivos ate Inc. contra la rubéola, existe la preocupación de que la vacunación eocupaciones en relación con riesgo teórico de que se produzca una infección en el feto tras la vacu

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