Braverman.Tiroides_11ed

72 SECCIÓN I n La tiroides normal

Yodación

FIGURA 4-9. Oxidación de yodo, orga- nización y acoplamiento. El hemo en las peroxidasas nativas se encuentra en la forma férrica (FeIII). El producto de la reac- ción de TPO con H 2 O 2 , una reacción de dos electrones que resulta en la reducción de H 2 O 2 a H 2 O y oxidación de la enzima, se llama compuesto I (E-O o TPO-O). Se remueve un electrón del hierro dando lugar a un oxiferrilo (FeIV = O) intermedia- rio, el segundo electrón es eliminado del anillo de porfirina, un estado denominado radical catión π . A pesar que la naturaleza de las especies yodantes no se ha deter- minado con certeza (OI - , HOY, I + ), el yodo después se oxida en una reacción de dos electrones, y son yodados algunos tirosi- los seleccionados. En la reacción de aco- plamiento, se propone que las sucesivas oxidaciones de un electrón de residuos de tirosilo hormonogénicos en la tiroglobulina (TG), mediadas por el compuesto I y el compuesto II de TPO, dan como resultado la formación de radicales DIT, antes que dos yodotirosilos se acoplen en una reac- ción no enzimática para formar T4 (o T3).

H 2 O 2

H 2 O

I −

TPO-OI − o TPO-I +

TPO Compuesto I π + - Fe IV

TPO Fe III

TPO Fe III

DIT DIT TG

Tyr Tyr

TG

Acoplamiento

Fe IV O

Fe IV O

Fe III

Fe III

+

TPO Compuesto I + - Fe IV

TPO Compuesto II Fe IV

TPO nativa Fe III

TPO Fe III

No enzimático

H 2 O 2

H 2 O

DIT DIT

DIT DIT

T4 TG

DIT DIT

TG

TG

TG

dios, los principales sitios aceptores hormonogénicos en la tiroglo- bulina humana se encuentran en las posiciones 5, 1 291, 2 554, 2 568 y 2 747 (137,148,270,271). Los sitios donantes incluyen los residuos de tirosina 130, 847 y 1 448. El sitio de formación de T4 más importante se encuentra en la tirosina 5, y hay evidencia de que la tirosina 130 es el sitio donante dominante (274). El sitio

principal de formación de T3 implica el acoplamiento de MIT y DIT que implica el antepenúltimo aminoácido opuesto (Tyr2744) de los dos monómeros que forman el dímero TG (275).

pH 7.0 La yodación y la reacción intramolecular de acoplamiento han sido estudiadas in vitro empleando sistemas mínimamente recons- tituidos que contienen TPO, tiroglobulina, yodo radiomarcado y SAMPLE 1mg/mL 1µM 0.5µM/mL 50µM 5 µg/mL 50 40 30 20 MIT Átomos de I por molécula DIT TPO 131 I - Yodo Tg Glucosa Glucosa oxidasa Buffer fosfato Incubación a 37 ºC

12

11

10

9

8

7

6

5 4

FIGURA 4-10. Evolución temporal de la yodación y de la formación de DIT, MIT, T4 y T3 en tiroglobulina yodada en las condiciones indicadas. La tiroglobulina contenía 0.038% de yodo (dos átomos de yodo por molécula). El valor de A 410 /A 280 para TPO fue 0.38. La reacción se inició mediante la adición de glucosa oxidasa (100 U/mg). (Tomado de Taurog A. Síntesis hormonal: metabolismo del yodo tiroideo. En: Braverman L, Utiger R, eds. Werner and Ingbar’s the Thyroid: A Fundamental and Clinical Text . 8ª Ed. Filadelfia, PA: Lippincott Williams & Wilkins; 2000: 61.)

3 Residuos por molécula de Tg

10

T 4

2

1

T 3 (RIA)

0

45

55

60

40

50

25

20

30 35

15

5 10

Tiempo de incubación (min)